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凝膠滲透色譜(GPC)在農(nóng)藥殘留分析中的應(yīng)用

點(diǎn)擊次數(shù):6482 更新時(shí)間:2017-02-23

凝膠層析色譜作為一種樣品的凈化手段之一,在國(guó)外應(yīng)用的已較普遍,在我國(guó)應(yīng)用的還不普遍,隨著分析技術(shù)的發(fā)展,在我國(guó),GPC在農(nóng)藥殘留前處理分離、凈化方面的應(yīng)用將越來(lái)越普遍,尤其是在富含脂肪、色素等大分子的樣品分離凈化方面,具有明顯的凈化效果。
凝膠滲透色譜的基本組成為六通閥、凈化柱、泵等;全自動(dòng)型主要由樣品進(jìn)樣和收集系統(tǒng)、泵、分離柱、溶劑及計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng)等。
凝膠滲透色譜的分離原理與通常使用的柱層析的區(qū)別主要是:通常柱層析是利用填充物、樣品和淋洗劑之間極性的差別來(lái)達(dá)到分離目的,而凝膠層析儀則是利用化合物中各組分分子大小不同而淋出順序先后的不同而達(dá)到分離目的的,淋洗溶劑的極性對(duì)分離的影響并不起決定作用;對(duì)于凈化含脂肪、色素較多的樣品具有明顯的優(yōu)勢(shì)。
我們就油脂、農(nóng)藥和淋洗劑之間的關(guān)系進(jìn)行了比較研究,現(xiàn)將結(jié)果總結(jié)如下:

  1. 試驗(yàn)儀器及試劑:DS230P凝膠滲透色譜系統(tǒng) (德世科技)GPC-1002A (定量線圈:5mL, 玻璃柱:25mm*600mm,柱填料:BIO-3X,填充方法:取50g填料,用相應(yīng)的淋洗劑浸漬,使填料充分溶脹后,裝入柱中,淋洗劑流速5mL/min,  淋洗劑為:乙酸乙酯:環(huán)己烷=1:1和乙酸乙酯:環(huán)己烷=3:7
  2. 試驗(yàn)方法:

 2.1 油脂流出曲線的制作:量取2mL食用色拉油(每毫升色拉油重0.98425克)。
 2.1.1 方法: 淋洗劑為1:1乙酸乙酯:環(huán)己烷和3:7乙酸乙酯:環(huán)己烷
用不同的淋洗劑分別將食用油稀釋定容至10mL,進(jìn)樣后,分段收集于圓底燒瓶中(0-30mL、30-40mL、40-50mL、50-60mL、60-70mL、70-80mL、80-90mL、90-100mL、100-110mL、110-120mL、120-130mL、130-140mL、140-150mL、150-160mL),濃縮至干,用稱重法量出每一段淋洗出的油的重量,每種淋洗劑重復(fù)一次,結(jié)果見(jiàn)下表。
 

淋洗段
mL
1:1 3:7 1:1 3:7
淋出油重量g 淋出油重 g 淋出油重 g 淋出油重 g
0-30        
30-40        
40-50        
50-60        
60-70 0.0367 0.0255 0.0083  
70-80 0.223 0.1051 0.1792 0.3410
80-90 0.4116 0.2949 0.4841 0.3870
90-100 0.3478 0.3786 0.3603 0.1993
100-110 0.1407 0.2638 0.0872 0.0446
110-120 0.0464 0.0148 0.0140 0.0092
120-130   0.0012    
130-140        
140-150        
150-160        

 

 
2.1.2 油脂淋出曲線(見(jiàn)圖1、圖2)



    從試驗(yàn)數(shù)據(jù)可看出:在以上試驗(yàn)條件下,油脂流出范圍基本保持在70-110mL,而70%以上是在70-100mL流出,受溶劑極性的影響不大。
3. 農(nóng)藥流出曲線制作
   在油脂流出曲線制作的基礎(chǔ)上,我們選則了幾種農(nóng)藥及其代謝物進(jìn)行了流出曲線的制作,方法如下:將農(nóng)藥用相應(yīng)的溶劑配制成一定濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液后,取一定量濃縮并轉(zhuǎn)移至GPC淋洗溶劑中且定容至10mL。
   GPC實(shí)驗(yàn)條件同油脂條件,并每5mL分段收集流出溶劑,濃縮定容至1mL,用氣相色譜儀進(jìn)行測(cè)定,計(jì)算回收率并找出流出范圍。
3.1 試驗(yàn)農(nóng)藥的回收率范圍: 94-108%.
3.2 試驗(yàn)農(nóng)藥的流出范圍: 淋洗劑(7:3)為:120-180mL; 淋洗劑(1:1)為:115-185mL.

 

3.3  實(shí)驗(yàn)結(jié)果1 (淋洗劑為7:3)

農(nóng)藥名稱 每段流出農(nóng)藥的面積    
80-
85
85-
90
90-
95
95-
100
100-
105
105-
110
110-
115
115-
120
120-
125
125-
130
130-
135
135-
140
140-
145
145-
150
150-
155
155-
160
160-
165
165-
170
170-
175
175-
180
180-
185
185-
190
190-
195
195-
200
 
英文名 中文名  
atrazine 莠去津                 760 2569 5996 4132 3302 1593 986                    
carbofuran 克百威                         1285 4708 10960 9930 7274 1815              
3-OH
carbofuran
三羥基克百威                       831 3108 4417 3657 1308                  
Fenitrothion 殺螟硫磷                             554 2376 9351 9290 6767 2586          
α-HCH 六六六                   264142 1474803 2500924 3278324 1412540 347487                    
metolachlor 異丙甲草胺                       270305 1525213 381534 176109                    
pirimicarb 抗蚜威                               640 3809 5279 6268 3750          
vinclozolin 乙烯菌核利                 266088 790221 1675722 1142204 728819 280916 164739                    
                                                       

  
 
3.4  實(shí)驗(yàn)結(jié)果2 (淋洗劑為1:1)

農(nóng)藥名稱 每段流出農(nóng)藥的面積    
80-
85
85-
90
90-
95
95-
100
100-
105
105-
110
110-
115
115-
120
120-
125
125-
130
130-
135
135-
140
140-
145
145-
150
150-
155
155-
160
160-
165
165-
170
170-
175
175-
180
180-
185
185-
190
190-
195
195-
200
 
英文名 中文名  
atrazine 莠去津               1618 3870 4331 3993 4646 2000                        
carbofuran 克百威                       869 4036 10888 13732 5931 1686                
3-OH
carbofuran
三羥基克百威                       2748 4715 3507 1146                    
fenitrothion 殺螟硫磷                             4213 8450 8792 4099 1366            
fenvalerate 氰戊菊酯             118122 327323 528828 545225 480981 570811 294364 153506                      
fluvalinate 氟胺氰菊酯         114975 351409 649497 351098                                  
α-HCH 六六六                   151019 492280 1818060 3682928 3108705 1194431 179927                  
metolachlor 異丙甲草胺                     223859 731394 1426836 1567545 920221 296761                  
omethoate 氧樂(lè)果                                 834 1691 2391 1682          
pirimicarb 抗蚜威                               595 2341 4935 5346 3791 1450        
vinclozolin 乙烯菌核利                 322729 608379 1011363 1869286 1411696 531949                      
                                                       

 

 
 
 


3.5 同一種農(nóng)藥在不同淋洗劑中淋出范圍的比較:

圖3  莠去津淋出曲線

圖4 克百威林出曲線

圖5 三羥基克百威林出曲線

圖6 殺螟硫磷淋出曲線

圖7 六六六淋出曲線

圖8 異丙甲草胺淋出曲線

圖9  乙烯菌核利淋出曲線
 
4. 結(jié)論  
從以上實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和圖譜可看出:同一種農(nóng)藥通過(guò)凝膠色譜用不同的淋洗劑淋洗,其淋出的范圍變化不大,一般相差在±5mL左右,與油脂林出結(jié)果基本一致。
通過(guò)油脂和部分農(nóng)藥淋洗試驗(yàn),進(jìn)一步了解了凝膠色譜儀凈化的機(jī)理和應(yīng)用條件,掌握了油脂和農(nóng)藥的不同淋出范圍:油脂一般淋出在70-110mL;農(nóng)藥一般淋出在110-170mL淋出的居多,利用這一特點(diǎn),在對(duì)富含油脂、蛋白質(zhì)、色素等樣品進(jìn)行凈化時(shí),可先考慮利用GPC先將大分子雜質(zhì)去掉,在結(jié)合其它凈化方法(如柱層析法等)進(jìn)一步凈化來(lái)去掉小分子雜質(zhì),終達(dá)到凈化的目的。
 

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